響應(yīng)面設(shè)計(jì)法是可靠的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)及分析方法， 可通過(guò)過(guò)程的回歸擬合計(jì)算出響應(yīng)于各因素水平的 響應(yīng)值，在提取試驗(yàn)中往往能夠得到最優(yōu)工藝參數(shù)， 是解決多變量問(wèn)題的一種有效統(tǒng)計(jì)方法。根據(jù)單因素試驗(yàn)的結(jié)果，采用響應(yīng)面法進(jìn)一步 優(yōu)化乙醇提取阿納其根總黃酮的提取工藝，同時(shí)，基 于前期研究發(fā)現(xiàn)的其具有改善岡田酸( okadaic acid， OA) 對(duì) PC12 細(xì)胞損傷的作用基礎(chǔ)上。調(diào)溫電熱套( DZTW 型，北京市永光明醫(yī)療儀器 有限公司) ; 電子分析天平( SQP 型，德國(guó)賽多利斯) ; 恒溫水浴鍋( XMTD － 7000 型，北京市永光明醫(yī)療儀 器有 限 公 司) ; 酶 標(biāo) 儀 ( Go 1510 型，美 國(guó) Thermo Fisher) ; 旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器( RE － 52AA 型上海亞榮生化儀 器廠) ; 循環(huán)水式多用真空泵( SHB － BA95 型，鞏義 市英峪 予 華 儀 器 廠) ; 數(shù)控超聲波清洗器 ( KQ － 250DE 型，昆山市超聲儀器有限公司) ; 垂直電泳儀( 125 － BR 型，美國(guó) Bio － Rad 公司) ; 凝膠成像系統(tǒng) ( Gel Doc XR 型，美國(guó) Bio － Rad 公司) ; 高速冷凍離 心機(jī)( Allegra 64R 型，德國(guó) Benkman 公司) 。

    在提取時(shí)間為 60 ～ 100 min 范圍內(nèi)，隨著提取時(shí)間延長(zhǎng)，總黃酮得 率先提高后降低，于 2 h 時(shí)最高，故選取提取時(shí)間 1 ～ 3 h 進(jìn)行響應(yīng)面優(yōu)化分析。在提 取次數(shù)為 1 ～ 4 次范圍內(nèi)，隨著提取次數(shù)增加，總黃 酮得率先增大后減小，于提取 2 次時(shí)最大，故最終確 定最佳提取次數(shù)為 2 次。在乙醇濃 度為 60% ～ 90% 范圍內(nèi)，隨著乙醇濃度升高，總黃酮 得率先增大后減小，乙醇濃度為 70% 時(shí)，總黃酮的提 取效果最好，故選擇乙醇濃度 60% ～ 80% 進(jìn)行響應(yīng) 面優(yōu)化分析。在提取溫度為 60 ～ 100℃范圍內(nèi)，總黃酮得率呈現(xiàn)先升后降的趨勢(shì)，于 提取溫度為 80℃時(shí)達(dá)到最高，之后有所下降，故選取 提取溫度為 70 ～ 90℃進(jìn)行響應(yīng)面優(yōu)化分析。